和评论:生药学和植物化雷竞技苹果下载学》杂志上的研究表明
菜单e-ISSN: 2321 - 6182 p-ISSN: 2347 - 2332
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Osvaldo r .否决权,泰国人r . Casagrande雷内·a·费雷拉,基督徒们汉堡,安琪拉Malheiros,库托当归g*
核de Investigacoes Quimico-Farmaceuticas (NIQFAR),淡水河谷大学做伊塔雅伊(UNIVALI)。Rua Uruguai n 458º,setor E1, CEP 88302 - 202,伊塔雅伊- SC,巴西
收到:07/03 / 2015;接受:10/04 / 2015;发表:15/4/2015
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Campomanesia reitziana,俗称guabiroba南亚和巴西南部,属于桃金娘科家庭。在其他物种,Campomanesia xanthocarpa已经被用于减少饥饿的咀嚼树叶。我们的研究旨在描述Campomanesia reitziana作为制药原料。新鲜的叶子被植物分析描述。干燥后,叶子被粉,特点是干燥失重(LD)、粒子大小、水可萃取物(EM)、道达尔和酸不溶性灰分(TA和友邦保险)、总类黄酮(交通)和总酚(TPC)内容,和薄层色谱(TLC)概要文件。树叶粉分为粗粉,5.43 (%,w / w)的助教和0.55 (%,w / w)的友邦保险,23.88% (w / w)的新兴市场,16.30毫克/克TPC的交通和2.95毫克/克。TLC透露的存在一个主要的类黄酮,可能是糖基化的酚类化合物,通过核磁共振分析指出,这需要进一步的研究来识别。
质量控制,Campomanesia reitziana, Campomanesia xanthocarpa,类黄酮,酚醛树脂
巴西人容易获得许多类型的药用植物由于丰富的生物多样性,特别是在他们的国家。调整这一特性与当前文化和缺乏财政资源,使用植物治疗疾病是常见的在这个人口。获得这些草药活性化合物,建立质量标准是必要的,以确保最终产品的效率,因为,即使在相同的植物物种,生物多样性相关因素,培养,收集和随后的治疗可以决定性影响的特点是否适合预期用途(1- - - - - -3]。
每个物种都有一些独特的特点,识别应该从大的宏观结构开始。例如,如果植物是一种草本植物,它是观察叶子的位置、鲜花和分支机构,组织形式的阀杆。然而,制药行业的惯例是原料已经被工厂的供应商。因此,显微鉴定的质量控制至关重要草药药物为了防止掺假原料(4- - - - - -6]。
叶子的几个物种的桃金娘科常嚼减少饥饿和促进减肥(7]。树皮和树叶guabiroba那个宿舍叫赖茨的收敛剂,用于治疗腹泻和膀胱炎(8]。桃金娘科是一个家庭至少有132属,5600种,包括属Campomanesia Ruiz & Pavon 41种和32是巴西特有植物(9,10]。
Campomanesia reitziana d·罗格朗普遍在巴西被称为“guabiroba”或“那个宿舍叫赖茨guabiroba”,属于家庭桃金娘科,是本地,流行和分布在南部和巴西南部[10- - - - - -12]。Campomanesia树木和灌木的一个属,范围从阿根廷北部到特立尼达,从巴西到安第斯山脉和秘鲁、厄瓜多尔、哥伦比亚(11]。
形态和解剖研究桃金娘科的相关(13- - - - - -15]。下列人物似乎分类学的有用的桃金娘科家族:表皮常见的单元格格式,存在dibrachiate毛状体,无色的皮下层细胞层和中脉的形状15]。在Campomanesia有(3)4-18小室的子房,成为增厚和腺体的城墙随着果实的成熟。有几个胚珠每室,但通常,或只有一个,中止。在肥沃的小室种子有一个非常微妙的,种皮薄,但种子就是有小室的墙的保护,作为假种子外套(11]。然而,一些物种之间的边界是知之甚少,出于这个原因,它(1986)提到的三组的形成主要是基于字符的鲜花,其中Campomanesia reitziana罗格朗Campomanesia xanthocarpao . Berg属于同一个组命名为“Campomanesia xanthocarpa情结”。
考虑使用错误的植物物种的风险生产草药、诊断的重要性Campomanesia reitziana突出显示。例如,尽管Campomanesia reitziana d·罗格朗的特点是树叶,Campomanesia xanthocarpa(集市)。o·伯格提出了一种宽形态变化各种大小的叶子和纹理。Campomanesia xanthocarpa发生最接近海岸,个人一直和更健壮的树叶。的叶子Campomanesia reitziana可以水泡状与否,与利润率明显齿状的,基部通常心形,腺体只在远轴的表面可见。小苞片可以持续到今天的水果和边缘齿状的16]。
桃金娘科家族的特点是精油和多酚类物质的存在17]。研究报道中类黄酮的存在物种Campomanesia [18- - - - - -20.]。在Campomanesia guazumifolia、槲皮甙、杨梅酮和3-O-rhamnoglicosid是孤立的;在Campomanesia下毛竹,杨梅酮;在Campomanesia xanthocarpa, miricitrina和芦丁21]。类化合物和黄烷酮类也被隔离和标识的叶子Campomanesia adamantium物种(22]。
在巴西,当前立法授权的生产和商业化草药产品需要文档的所有操作直接或间接参与生产。为了这个目的,官方规格的医药原料的存在,来自药用植物,代表了一个重要一步建立最低质量标准验收(23]。
本研究旨在为质量控制Campomanesia reitziana叶子的生药学认证,和物理化学特征,以作为用作中药生产的原材料。
植物材料
成人的叶子Campomanesia reitziana和Campomanesia xanthocarpa收集从一些标本的伊塔雅伊,SC(26°55 45.3”年代和48º39 12.8”W), 2010年8月。凭证标本的Campomanesia reitziana沉积在巴博萨罗德里格斯标本(Itajai-SC),与哈佛商业评论代码52578。凭证标本的Campomanesia xanthocarpa沉积在罗伯特·米格尔Klein博士标本(Blumenau-SC)代码FURB 11905。的叶子Campomanesia xanthocarpa只用于植物分析比较。
宏观分析
宏观分析包括目视检查和立体显微镜。叶序和叶元素(脉络、纹理、颜色、格式、顶点、基地、保证金和羽毛)观察,然后比较报告文学的形态模式(24,25]。
显微分析
树叶解剖研究固定inin formalin-acetic-acid——酒精(FAA) 48小时,随后存储在70ºGL乙醇(26]。从手工制作的幻灯片准备削减,澄清与商业次氯酸钠溶液(50%),用蒸馏水洗净,然后用酸化水,再用蒸馏水。一些paradermic,横向叶片(中间第三低的部分)和叶柄(中间部分)沾阿斯特拉蓝色(1%)在50ºGL hydroethanol十分钟解决方案(27]。微量化学反应是应用与苏丹III揭示亲脂性的物质,和盐酸间苯三酚被用来揭示了木质化的元素(24]。分析了晶体的化学性质通过溶解在酸(28]。观察近轴的远轴的表面气孔,paradermic部分。他们可视化40 x 100 x 400 x放大(29日]。测量的结构被使用千分尺规模板和徕卡CME光学显微镜观察被抓获。
以前的治疗的植物材料
集合后,叶子被清除异物和放置在托盘在一个干燥室,直到水分稳定。干叶子被磨成粉末筛在锤式粉碎机3毫米。
干燥失重测定新鲜植物材料
样品12 g (n = 5)新鲜的叶子被安置在一个干燥的房间。干燥失重(%,w / w)则由每24小时,直到稳定的质量差异。
干燥失重测定
样品1 g (n = 4)的干树叶粉进行了分析,利用红外平衡在105°C (30.]。
通过筛分粒度分析
大约50克(n = 3)干和粉植物药物通过筛子的1,0.850,0.500,0.250和0.150毫米15分钟。方程1是用来计算平均粒径(方程1)和一个柱状图绘制的粒度分布(31日]。
(1)
议员=平均颗粒大小(毫米);马=平均孔径(毫米)。
总灰分测定盐酸不溶性灰分
这些测试是根据药典执行过程(30.3 g),使用三个样品。
化学表征定性薄层色谱和核磁共振
约1克的干和粉植物,连同20毫升酒精70°GL报回流20分钟,按下通过Sontara®和滤纸过滤制备样品的解决方案。样本应用硅胶GF254表,使用两个洗脱液系统:1)甲酸:乙酸:水:乙酸乙酯(11:11:27:100,v / v) [32];和2)乙酸乙酯:丙酮:水:甲醇(25:8:1:3,v / v)。槲皮素、芦丁和异槲皮苷被用作参考物质溶解在甲醇。在室温下干燥后,斑点检测在365 nm紫外线照射下,与自然产品试剂喷洒后,由1% (diphenylboryloxy)乙胺(w / v)甲醇解的启示,和聚乙二醇4000 0.5% (w / v) ethanolic固定的解决方案。
的1H (300 MHz)光谱的乙醇提取Campomanesia reitziana叶子被记录在瓦里安双子座300光谱仪的CD3OD。化学位移表达的ppm。
水溶性抽提
解决方案1:10 0 g干和粉的叶子在水中加热直到沸腾,10分钟。样品的20 g (n = 3)滤液的干和干100±5°C。提取的物质被百分比计算干残渣和原料之间的比例332)使用方程。
(2)
EM =提取物质(%,w / w);g =干残渣的质量(g);DF =稀释因子(5);W =质量(g)的样本和LD =干燥失重的样本(%,W / W)。
总酚含量
样品被分光光度法评估(紫外)与一些修改34]。
校准曲线的准备:校准曲线在750 nm获得股票水溶液的没食子酸(5.0到500毫克/毫升)60分钟后Folin-Ciocalteau试剂的反应为0.5毫升,10毫升的10%碳酸钠的比例0.1:25(股票的解决方案:水,v / v)。
样品制备
500毫克的原材料是由声波降解法和100毫升乙醇提取10分钟。60分钟后吸光度是阅读750海里与0.5毫升的Folin-Ciocalteau试剂反应,和10毫升10%的碳酸钠:25 0.1的比例(示例解决方案:水,v / v)。总酚含量和没食子酸当量计算,使用方程3:
(3)
GAE =没食子酸当量(毫克/克),C =样品溶液中没食子酸浓度(毫克/毫升),记者校准曲线方程,计算了DF =稀释系数(25000),w =干质量和动力叶(g)、LD =干干燥失重和动力(%)。
总类黄酮含量
样品被分光光度法评估(紫外)与一些修改35]。
校准曲线的准备:415 nm的校准曲线获得乙醇解槲皮素(2.5 - 25μg /毫升)60分钟后间变性大细胞淋巴瘤引起的反应310%的解决方案。对于每个浓度,比较没有AlCl的解决方案3是准备。
样品制备
1.5到5.0 g的原料提取乙醇70% (v / v)为10分钟,声波降解法确定的理想样本的质量测试。提取一式两份。整除500μL每个提取和试剂(200μL醋酸钠1 N, 500μL间变性大细胞淋巴瘤引起的310%解决方案)被稀释至最后一卷5毫升。进一步反应是产生所述校准曲线。总类黄酮含量计算槲皮素相同,使用方程4。
(4)
量化宽松=槲皮素等效(毫克/ g), C =槲皮素浓度的样品溶液(μg /毫升),槲皮素校准曲线的方程,计算了DF =稀释系数(1000);w =质量的药物植物(g)、LD =干燥失重的干叶子(%)。
宏观分析表明,Campomanesia reitziana具有以下特点:简单的叶子,叶序相反;两个表面上薄如纸的,长圆形,无毛;先端尖;基部圆形或罕见的急性;边缘齿状的;和脉络羽状(图1)。midvein和二级静脉的近轴面槽或印象,和brochidodromous脉络是观察。叶柄短或非常短(1 - 5毫米长),从直接引导各不相同。的叶子Campomanesia reitziana有一些形态相似之处与其他物种的桃金娘科的家庭,通常简单的叶子,相反叶序和常绿着色36]。Campomanesia reitziana叶子形态是类似于其他研究[37,38),特别是在叶组成,颜色、一致性、边缘、轮廓和叶柄。
图1:宏观特征(叶子)Campomanesia reitziana。
在显微特征方面,我们得到以下描述:不对称的异构叶肉(异),显著异细胞包含柱状晶体的存在(草酸钙),大尺寸(A, B)和分泌腔(A),表皮细胞与蜿蜒的轮廓(C);单列的表皮向轴的横截面的表面,anomocytic气孔(D)和腺(E)和non-glandular多细胞毛状体(F)的前视图,远轴的表面。在横截面,midvein (G)和叶柄(H)直接向轴的表面,凹侧表面。都有一个维管束厚壁组织的晶体包围草酸钙在薄壁组织和油腺体。此外,还有表皮的毛状体(图2)。
图2:Microscopiccharacteristics(叶子)Campomanesia reitziana。
的叶子Campomanesia reitziana有解剖与其他药用物种桃金娘科家族的相似之处,比如背腹的叶肉,草酸钙晶体,分泌腔,non-glandular毛状体(39),以及分泌腔的存在营养器官的精油(36]。
物种的叶肉Campomanesia xantocarpa被细柱状晶体的存在为特征的中心,单列的表皮,油腺体,与一个或两个柱状薄壁组织细胞层,海绵组织大约6到8细胞层。midvein地区的特点是直接向轴的和圆形的远轴的表面。毛状体的近轴面观察。在远轴的侧脸,单细胞non-glandular毛状体被观察到。叶柄的特点是大量的柱状晶体和几个tector毛状体。
相对,在物种Campomanesia reitziana,单细胞non-glandular毛状体,与光滑的表皮,midvein观察。叶柄的特点是略凹和凸轴外的表面。观察大量的柱状晶体,以及一个中央维管束和大发生non-glandular毛状体表皮区域,区分这两个物种的一个重要特征。
新鲜的叶子的干燥减量控制显示水分平衡为49.78±0.90 (%,w / w)在24 h, 8.61±0.46 (%, w / w)的最终水分。这个值属于可接受的范围内的水分(8 - 14 %,w / w) [30.]。铣削后,水分保持可接受的和不变,为8.69±0.53 (%,w / w),以及良好的起始物料的物理特性。就生产而言,这种行为是非常可取的,因为它需要更少的时间和精力,表明初步操作是有效的。
原料的粒度分布(图3)显示,75.15%的颗粒小于0.850,大于0.250毫米。根据巴西药典[30.),与这些特征划分为粗粉,颗粒直径小于1.7毫米,最少355μm大于60%。干和粉的平均粒径为0.493±0.006毫米。
图3:粒度分布的干和粉的叶子Campomanesia reitziana。
样品的平均5.43±0.0001 (%,w / w)总灰分和0.55±0.0001 (%,w / w)的酸不溶性灰烬。灰分的测定允许验证非易失性无机杂质的存在可能是污染物(40]。酸不溶性灰测试将允许验证泥土或沙子等污染物的残留,经常观察到的根(40]。相关杂质的低价值发现将Campomanesia reitziana高的树,用树叶没有接触土壤污染物。雷竞技网页版
关于化学质量控制材料,没有化学或生物测定,可萃取物的含水量是一种技术,它决定了有效成分的提取与一定量的溶剂药用植物材料用于(41]。在Campomanesia reitziana树叶的水可萃取物为23.88±1.92 (%,w / w)。
总酚含量被表示为没食子酸等价的。作为结果,它被发现16.30±1.48毫克/克,使用校准曲线的方程获得了没食子酸的解决方案(y = 0.0988 x + 0.0012, r2= 0.9949)。
类黄酮含量表示为槲皮素是等价的。最好的样品来确定总黄酮含量为2.5 g,溶剂后开始饱和,吸光度值趋于稳定。情商是2.947毫克/克,使用校准曲线的方程得到槲皮素的解决方案(y = 0.0153 x + 0.0153, r2= 0.9959)(图4)。
图4:总类黄酮含量(相当于槲皮素)在干和粉的叶子Campomanesia reitziana。
的乙醇(70ºGL)提取Campomanesia reitziana叶子也以薄层色谱法。系统筛选了与乙酸乙酯:丙酮:水:甲醇(25:8:1:3,v / v),显示一个独特的橙色现货与射频0.6,表明存在一个主要的类黄酮,因为它揭示了自然产品的试剂,以黄酮类特异性,提供黄橙色或黄绿色斑点,类黄酮苷的特征(32]。然而,没有一个黄酮类化合物通常存在于另一种来自同一个属,如芦丁、槲皮素和异槲皮苷被薄层色谱鉴定。核磁共振分析样品的提取、芳香环的相关迹象氢(6 - 8 ppm)和许多附近氢氧(3 - 6 ppm)观察,可以加强配糖体单元的存在,证实存在极酚醛/类黄酮化合物。这一发现是依照这个提取酚类和黄酮类内容量化。其他信号低于2.5 ppm表明烃氢。
总之,这项工作提供了有用的信息在宏观和微观特征的植物材料,如存在non-glandular thricomes表皮地区唯一证据发现歧视Campomanesia reitziana和Campomanesia xanthocarpa,以及化学表征,之前从来没有学过,这有助于目的原材料的质量控制参数供不同行业领域的草本天然产品。
作者感谢金融支持和奖学金授予泰国r . Casagrande由当地机构奖学金ProBIC / UNIVALI。
