和评论:化学》杂志上的雷竞技苹果下载研究表明
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e-ISSN: 2319 - 9849
2部门分析化学大学、学院制药、拖拉,拖拉,突尼斯
收到日期:11/01/2017接受日期:22/01/2017发表日期:29/11/2017
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主要目标是开发和验证一个方法来分析同时九残留溶剂的指导方针中提到国际协调会议(我)Q3C:甲苯、甲醇,乙醇,丙酮,propan-2-ol、乙酸乙酯、四氢呋喃、二氯甲烷、乙腈。色谱分离实现了db - 624列(30 m×0.53毫米,1.8μm),氮载气和火焰离子化检测器。我们已经优化了载气流量、编程烤箱温度和分流比。我们已经选择了二甲亚砜为溶剂溶解。线性的开发方法验证,精度、准确性和特异性,然后申请的研究和量化两个药物残留溶剂含量的物质。优秀的结果。发达的方法被证明是简单,产生对称的峰形状,良好的分辨率和合理的保留时间为17分钟前溶剂洗脱,具体,精确和线性范围从量化的报告水平限制限值的120%,相关系数大于0.999。醋酸正丁酯作为内部溶剂的使用提高了线性度和精度,补偿发生变化。两种药物物质残留溶剂含量的量化nefopam伊诺肝素,没有超过指定的金额我指导方针。因此,我们的方法可以应用常规量化的残留溶剂含量不同的活性物质,为制药公司和研究实验室
气相色谱法、残留溶剂、顶部空间,分析验证,火焰离子化检测、分析方法、内部标准
他们也用于线生产清洁,避免交叉污染。药物的残留溶剂(RS)是定义为有机挥发性化学物质中使用或产生的活性物质的生产或辅料,或在医药产品的准备。他们是必不可少的在制药过程的每个步骤(反应、分离和配方),改善反应性能,和一些特点的生产等活性物质的结晶形式,溶解性和纯度良好生产规范(后1]。
然而RS并不完全消除制造技术及其跟踪可以留在成品,可以影响感官如气味或味道特征是病人,不愉快的有效性或治疗效果,生物利用度、安全与稳定的医药产品(2,3]。此外,他们还可能加速产品的分解过程。
许多作者发表了文章多态性的医药产品和RS形态学上的影响,如三乙胺的影响RS三水合氨苄青霉素稳定和退化3]。RS主要也干涉的内容都有相互作用,如转让增塑PVC(聚氯乙烯)构成加热成形肺泡,从弹性体软木塞或添加剂3]。由于没有治疗受益于RS,他们中的很多人都认为是危害人类和环境,应该删除所有RS的生产过程在某种程度上,为了满足产品规格和良好生产规范。医药产品中杂质的控制的主要目标是制药行业分析师(4,5]。控制必须符合ICH Q3A (R2):在新药物杂质物质(6,7)和我Q3B:新药产品的杂质(8]。我采用了杂质指南RS和日常接触限度(我指导Q3C) [9]。其目的是推荐接受大量的RS在病人的药品安全,指示的使用更少的有毒溶剂和描述水平被认为是毒理学地接受。四个不同的类描述:溶剂中,而这将导致不可接受的毒性(第1类)应避免生产活性物质,赋形剂,可以强烈或医药产品,除非他们使用合理的风险-效益评估;溶剂与不太严重的毒性(二班)应该有限为了保护病人免受潜在的不利影响。理想情况下,应该使用更少的有毒溶剂(3班),实用。没有足够的第4类包括溶剂毒性数据被发现。符合我的指导方针,1级溶剂需要识别和量化,溶剂从类2个人应该限制在50到5000 ppm,和溶剂从3班必须识别和量化时发现超过0.5% (w / w)。发布第一个分析方法对RS在药典中,是一个损失的重量,这是一个简单而不是要求的方法,但是它有很多缺点,包括缺乏特异性、高检测极限(大约0.1%),和一个相对大量的样品需要执行测试(大约1到2 g),气相色谱法(GC),由于其良好的分离能力,较低的检测极限,由于有机溶剂的波动性和实质性的毛细管柱的分离能力,主导分析RS方法决定。在GC,样品直接溶解在合适的溶剂比注射(10,11)或顶部空间抽样(12,13]。顶部空间抽样是首选的,因为它避免液体或固体直接探测的能力。在顶部空间复杂抽样样本矩阵在固体或液体样本矩阵在液体或固体样品可以简化甚至消除的汽相(14]。
欧洲专著下章2.4.24“残留溶剂的识别和控制”(15]提出了两个程序A和B是有用的识别和量化RS。系统普遍使用的建议,同时系统采用B通常确认身份。这两个系统使用静态顶空GC与火焰离子化检测(FID)。
这个一般方法可以用于识别类1和2 RS当没有溶剂的信息可能出现在标本;作为一个限制类1和2的测试溶剂时在样品检测;3班的量化溶剂时是必需的。
实现的一般方法是一个有争议的话题在制药行业由于其有限的选择性和灵敏度16]。否则,一些技术问题的研究已经指出,例如,分析过程中出现的工件的盐酸盐的基本化合物N, N-dimethylformamide [17]。此外,这种一般方法不建议使用内部标准虽然克服基体干扰,提高GC分析的准确度和精密度。内部标准有效地补偿变量发生在样品提取和注入,尤其是对复杂样品制备过程(16,18,19]。此外,欧洲药典的一般方法有很长的运行时间达到满意的所有溶剂分离。出于这个原因,制造商试图找到自己的方法将更快、更容易,适应其特定样品和分析物(16,20.]。几个作者开发了测定方法的RS制药(21,22]。
这项工作的目的是开发一个同时九RS的分离分析方法,常用的活性物质制造属于类2和3,用顶空GC注射器,从欧洲药典推荐条件,通过优化几个参数以提高分析性能诸如分辨率、运行时,精密度和准确度;然后来验证新的开发方法,改善线性度和忠实标准的使用内部标准;和应用的研究和量化RS可能出现在药物物质,如甲醇,甲苯在nefopam水平;伊诺肝素和甲醇、乙醇含量。
活性物质和试剂
伊诺肝素和nefopam原材料分别采购从TECHDOW(中国)和ISOCHEM(法国)。本研究分析中使用的所有溶剂和试剂级(高效液相色谱级)。类2和3的溶剂甲醇、乙腈、二氯甲烷、甲苯、乙醇、丙酮、乙酸乙酯,propan-2-ol,四氢呋喃(四氢呋喃)、乙酸乙酯、醋酸正丁酯、二甲亚砜(DMSO)购买的西格玛奥德里奇(突尼斯)。
设备:顶部空间气相色谱法
GC(安捷伦科技G1530A)配备了安捷伦7694顶部空间注入器,耦合FID。毛细管柱DB 624长30米,内径0.53毫米和1.8μm膜厚度(安捷伦)使用。数据的采集和处理是通过使用电脑配备安捷伦ChemStation软件3.2.1版本。使用的其他材料平衡(丹佛仪器si - 234),玻璃器皿作为体积双行吸量管,烧瓶,烧杯,校准微量吸液管。
一般程序
欧洲药典条件
在这项研究中,系统选用条件从欧洲药典方法开发和验证(表1)[15]。
| 样本效用 | 水溶性的文章 | 大约250毫克的测试材料溶解在25毫升容量瓶和水,然后5.0毫升的这个解决方案转移到头部空间满瓶1.0毫升的水。 |
| 水不溶性的文章 | 大约500毫克的测试材料溶解在10毫升容量瓶与N, N二甲基甲酰胺,然后1.0毫升的这个解决方案转移到头部空间满瓶5.0毫升的水。 | |
| 注入源 | 头部空间取样器 | |
| 固定相 | 自然 | 交叉链接的混合物:(6%)Cyanopropyl-phenyl -二甲聚硅氧烷(94%)。 |
| 列 | 支持 | 熔融石英毛细管或半毛细管。 |
| 类型 | 30米×0.32毫米列1.8μm层涂有固定相(只对水溶性文章)或30米×0.53毫米wide-bore列涂上一层3.0μm的固定相。 | |
| 载气 | 氮气或氦气。 | |
| 载气流速 | 大约35 cm / s。 | |
| 进样口温度 | 140°C。 | |
| 分流比 | 1:5水溶性文章和1:3的水不溶性的文章(可以修改优化灵敏度)。 | |
表1:欧洲药典条件(系统)。
GC条件的优化
发达GC方法耦合的顶部空间注入器应该允许同时研究和量化的九个RS:甲苯、甲醇,乙醇,丙酮,propa-2-ol,乙腈,二氯甲烷,乙酸乙酯、四氢呋喃。我们开始条件后欧洲药典的系统a结果不足,如长时间运行和一个贫穷的决议,我们继续优化载气流量,编程烤箱温度和分流比。
标准和样品制备
样品制备解浓度为0.1 g / ml被溶解准备准确加权约0.5 g的活性物质分析成一个安捷伦科技制造20毫升平底顶空GC瓶,增加解决方案的5.0毫升S2,然后封瓶妥善配备隔褶帽。
内部标准溶液S2浓度为0.2毫克/毫升准备通过引入30毫升的DMSO溶液250毫升容量瓶和添加准确加权大约50毫克的醋酸正丁酯,完成DMSO的马克。
S3的标准解决方案是解决方案的准备通过引入30毫升S2 100毫升容量瓶,并添加准确加权约500毫克丙酮,乙醇500毫克,500毫克propan-2-ol, 500毫克乙酸乙酯,300毫克甲醇、二氯甲烷60毫克,89毫克甲苯、41毫克乙腈和72毫克四氢呋喃。这个标准溶液S3包含大约0.5毫克/毫升的丙酮,0.5毫克/毫升乙醇,0.5毫克/毫升propa-2-ol, 0.5毫克/毫升的乙酸乙酯,0.3毫克/毫升的甲醇,0.06毫克/毫升的二氯甲烷,0.089毫克/毫升的甲苯,0.041毫克/毫升的乙腈和0.072毫克/毫升的四氢呋喃。这些量与活性物质相比,对应于欧洲药典的固定限制5000 ppm的丙酮,乙醇的5000 ppm, propan-2-ol 5000 ppm, 5000 ppm的乙酸乙酯,甲醇的3000 ppm, 600 ppm的二氯甲烷、甲苯的890 ppm, 410 ppm的乙腈,和720 ppm的四氢呋喃(15]。
发达的验证方法
验证是对各种参数的要求下我指导Q2 (R1) [23- - - - - -26]。
特异性和选择性
选择性是由包含溶解溶剂空白解决方案的分析和内部标准,标准的解决方案包含九个RS混合物稀释在DMSO (S3)的解决方案。评价了该方法的特异性分辨率Rs之间最近的高峰。
线性
线性决定复制的级联稀释系列从一个标准的解决方案(S4) 120%的九个RS混合物。我Q2B指定最小线性范围从报告水平的量化限制到120%的极限值(24]。六个浓度被选在这个研究。我们已经检查了所有提到的RS的线性在这项研究中,由相关系数R2。
标准溶液在120% (S4)是由30毫升的S2解决方案引入100毫升容量瓶和添加准确600毫克的丙酮、乙醇600毫克,600毫克的propan-2-ol, 600毫克的乙酸乙酯,360毫克的乙醇,72毫克的二氯甲烷,106.8毫克的甲苯,49.2毫克的乙腈和86.4毫克的四氢呋喃。1/10稀释与解决方案2完成,然后我们用移液器吸取2毫升的这个解决方案到20毫升顶空GC瓶,妥善密封小瓶装有隔和卷曲的帽子。
精度
精度是决定一式三份三个浓度水平(120%、100%和80%)从S4的解决方案,并通过添加0.5克的活性物质。复苏百分比计算发现之间的比例和RS的引入量,指的是观察和真实价值。精度检查两个活性物质nefopam伊诺肝素,而RS可能现在是nefopam甲醇和甲苯,甲醇和乙醇的发生率。
精度
分析过程的精确表达了亲密之间的协议(分散程度)的一系列测量获得的多个采样相同的均匀样品在规定的条件下。精度可以考虑在三个层面:重复性、中间精密度和重现性。
分析过程的精度通常表示为方差,标准差(SD)或变异系数的一系列测量。确定分析方法建立精确的六种不同的参考解决方案的准备工作。中间精度由研究均匀样本的变化测定分析了两种不同的设备,或分析师或几天。
在我们的研究中,盘中inter-day精度,这是最需要标准,建立了分析药物在6复制解决方案在同一天注射,连续三天,分别。SD的价值和相对标准偏差(RSD)计算。
极限检测和量化的极限
检测极限(LOD)个人分析过程中被测物能被定量测定的最低金额,可以检测到,但不一定量化的确切数额。而量化的限制(定量限)是最低层次的分析物的浓度可以量化和可接受的精密度和准确度23]。
表达的LOD和定量限的标准差σ反应(拦截)和山坡上的刻度线(27]。Kumar等人也使用相同的数据(27]。一些作者选择基线噪声的估计这些限制(22,28,29日]。
分离条件的优化
初步的经验
获得的结果后,欧洲药典的系统条件不足,如长跑时间(30分钟)和一个贫穷的决议(Rs < 1)损失的洗脱时间的四氢呋喃和甲苯峰(约13分钟之间图1),所以该方法优化了检测和量化的9个RS满意的分辨率遥感在短期时间内使用一个内部标准。
图1:高频和甲苯的山峰。
列类型的选择
在文献中,许多固定阶段已经使用如列BP1 dimethylsiloxane (100%) (30.),DB-FFAP(聚乙二醇改性nitroterephtalic酸)27),DB-WAXETR(聚乙二醇)22]。在我们的研究中,经过多次试验,我们选择了柱db - 624展示欧洲药典的相同特征,这是专门为RS分析。这一列导致最好的分离,具有良好的分辨率(RS > 2)。
选择的溶剂溶解
溶解溶剂的选择应该是明智的,因为它影响了感性,平衡温度和时间。许多样品的溶解溶剂应该允许解散;具有较高的沸点,稳定性和可接受的21]。最常用的GC分析顶部空间水喷射器,DMSO, N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide,苯甲醇,1,3-dimethyl-2-imidazolidinone,和水的混合物/ N, N-dimethylformamide和水/ DMSO [31日]。可溶性物质的水是一种很好的溶剂,使用水/ N, N-dimethylformamide和水/ DMSO溶液混合物增加许多药物的溶解度,也物质的分配系数减小,提高转移从液体到气体。然而,如果药物的平衡温度接近沸点的溶剂,瓶中的压力可以增加危险(21),如果我们选择的混合水/ N, N-dimethylformamide和水/ DMSO,顶部空间喷射器的平衡温度应低于100°C,导致可怜的挥发溶剂的沸点高。在我们的研究中,我们选择了DMSO溶液由于其极性和溶解能力许多有机化合物,毒性较低,可能孵化瓶在高温度高于100°C (32]。许多作者还用DMSO作为溶解溶剂(27- - - - - -29日,32]。西迪基等人用N, N-dimethylformamide发展的九RS的控制的一种方法,在多西他赛(22]。
选择的内部标准
内部标准应该有一个色谱行为非常相似的化合物是化验,不干扰其他可能提出物质,有相同的属性对于检测系统,可在高纯度。我们有选择醋酸正丁酯作为内部溶剂从3班,没有多少活性物质的合成过程中使用。它的使用已经导致造成的可变性GC方法的修正与顶部空间系统。在文学,Teglia等人已经使用四个内部标准:苯和三氯乙烯量化的限制,较低的溶剂丙酮和正己烷为溶剂的量化限制(高32]。Clecio用二氧六环的内部标准的分析RS (728]。然而,文学中有许多发达的方法,没有使用一个内部标准(22]。
载气流量的优化
载气流量的减少从2.1 ml / min (35 cm / s)为1毫升/分钟(19 cm / s)改善了最近的山峰之间的分离。
分流比的优化
之间的分流比是不同的1/5和1/1。分流比1/1,我们已经获得了令人满意的情感。
烤箱温度的优化程序
为了获得一个分析时间短,我们已经开始烤箱温度程序的修改。通过裁判先前的研究在文学(表2),经过几个化验的温度改变计划,我们选择了这个项目:40°C 8分钟,然后提高到90°C的速度10°C / min,然后提高到240°C的速度40°C /分钟,保持最后的温度为5分钟。
| 研究 | 顶部空间 | 列 | 载气 | 烤箱 | 进样口 | 探测器 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Kumar et al。27] | 手动注射 | DB-FFAP 30 m×0.53毫米,涂以1.8μm层固定相。 | 氮 | 45°C 5分钟,5°C /分钟,85°C, 12°C /分钟,220°C | 220°C | 支撑材260°C |
| Clecio [28] | 欧洲药典条件 | zb - 624、30 m×0.32毫米 | 35°C和一个最小值,15°C /分钟,40°C 10分钟,18°C /分钟,235°C 8分钟,回到35°C | - - - - - - | 支撑材 | |
| 西迪基et al。22] | 平衡温度为100°C,平衡时间20分钟,转移温度120°C,加压时间2分钟 | 聚乙二醇、DB-WAXETR 60 m×0.250毫米;涂有0.25μm层固定相 | 40°C 5分钟,10°C /分钟,240°C 5分钟,回到40°C | 250°C | 支撑材,270°C | |
| Sivasaikiran [29日] | 平衡温度40°C, | db - 624, 30 0 m×53毫米,涂以3.0μm层固定相 | 氦 | 40°C 6分钟,10°C /分钟,130°C 8分钟,35°C /分钟,240°C 5分钟 | 100° | 支撑材250°C |
| Teglia et al。32] | 平衡温度为105°C,平衡温度45分钟,注入2.5毫升的气相 | 624 DB, 30米×0.53毫米,涂以3.00μm层固定相。 | 氮 | 40°C 20分钟,10°C /分钟,240°C 20分钟 | - - - - - - | 支撑材 |
表2:总结的一些研究文献为气相色谱法(GC)条件。
选择的条件
从之前的研究,我们提出了GC方法过程进行了总结表3。
| 固定相 | 自然 | (6%)polycyanopropyl-phenyl-siloxane poly-dimethyl-siloxane (94%)。 |
| 类型 | 30米×0.53毫米wide-bore列涂有1.8μm层固定相。 | |
| 载气 | 自然 | 氮 |
| 流 | 1毫升/分钟 | |
| 分流比 | 01:01 | |
| 烤箱 | 温度 | 保持在40°C 8分钟,然后提高到90°C的速度10°C / min,然后提高到240°C的速度40°C /分钟。这最终温度是5分钟。 |
| 进样口 | 温度 | 140°C |
| 探测器 | 类型 | 支撑材 |
| 温度 | 250°C |
表3:GC保留条件。
典型的色谱分离得到的9个RS在优化条件下,提出了图2。好分辨率(Rs > 2),对称的峰形状为每个组件和合理的保留时间可以看到所有的溶剂。
图2。九RS的分离。
验证结果
特异性和选择性
醋酸正丁酯的山峰和DMSO不干扰其他山峰(图3)和Rs优于2之间最近的峰值(表4)。
图3:山峰的醋酸正丁酯和DMSO溶液。
| 分析了溶剂 | 保留时间 | 相对保留时间:RRT | Rs(分辨率) |
|---|---|---|---|
| RT(分钟) | |||
| 甲醇 | 4.28 | 0.27 | |
| 乙醇 | 5.7 | 0.37 | 10.89 |
| 丙酮 | 6.67 | 0.43 | 7.03 |
| Propan-2-ol | 7.05 | 0.45 | 2.69 |
| 乙腈 | 7.41 | 0.47 | 2.44 |
| 二氯甲烷 | 7.91 | 0.51 | 3.52 |
| 乙酸乙酯 | 11.27 | 0.72 | 27.5 |
| 四氢呋喃 | 11.67 | 0.75 | 4.02 |
| 甲苯 | 15.04 | 0.96 | 47.64 |
| 醋酸正丁酯 | 15.61 | 1 | 14.17 |
| DMSO溶液 | 16 | 1.02 | 12.85 |
表4:保留时间、相对保留时间和解决残留溶剂分析同时进行。
线性
没有使用的内部标准,标准R2> 0.999无效分析RS,虽然许多研究在文学,R2> 0.99被认为是可以接受的(29日,32]。添加醋酸正丁酯后,获得了良好的线性关系为每个RS浓度与峰面积之间显示,该方法的线性范围从量化的报告水平限制限值的120%,相关系数大于0.999。在所有情况下,拦截被认为是微不足道的利用学生的学习任务(α= 0.05)。
统计结果之前和之后使用内部标准所示表5,显示内部标准的角色在改善方法的线性。
| 不使用的内部标准 | 使用内部标准 | |||
|---|---|---|---|---|
| 分析了溶剂 | 线性回归曲线 | R2 | 线性回归曲线 | R2 |
| 甲醇 | Y = x 0.0371 - 7.3232 | 0.9665 | Y = x 0.001 - 0.107 | 0.999 |
| 乙醇 | Y = 0.0529 x - 08091 | 0.9977 | Y = 0.001 x - 0051 | 0.999 |
| 丙酮 | Y = x 0.2196 - 27.326 | 0.9953 | Y = x 0.004 - 0.026 | 0.999 |
| Propan-2-ol | Y = x 0.0661 - 9.6613 | 0.9932 | Y = x 0.0014 - 0.0266 | 0.9994 |
| 乙腈 | Y = x 0.0861 - 0.2571 | 0.9904 | Y = 0.0018 -0026 | 0.999 |
| 二氯甲烷 | Y = x 0.0529 - 0.0306 | 0.9885 | Y = x 0.0011 - 0.0038 | 0.9992 |
| 乙酸乙酯 | Y = x 0.161 - 17.228 | 0.9946 | 0.0033 Y = x + 0.0766 | 0.9998 |
| 四氢呋喃 | 0.257 Y = x + 34.886 | 0.9598 | 0.0057 Y = x + 0.7265 | 0.9998 |
| 甲苯 | 0.3271 Y = x + 8.6573 | 0.9558 | 0.0051 Y = x + 0.3387 | 0.9995 |
表5:RS的校准曲线。
检测和量化的极限
LOD和定量限估计通过使用下列公式:情商(A1)和Eq。(A2)。
所示的结果表6。定量限广泛不如我获得规范分析了RS,所以我们可以得出结论,使这些溶剂的量化方法。
| 溶剂 | LOD (ppm) | 定量限(ppm) |
|---|---|---|
| 甲醇 | 76.65 | 232.28 |
| 乙醇 | 83.97 | 118.09 |
| 丙酮 | 59.97 | 181.73 |
| Propan-2-ol | 83.59 | 253.29 |
| 乙腈 | 9.41 | 28.52 |
| 二氯甲烷 | 9.58 | 29.02 |
| 乙酸乙酯 | 65.08 | 197.22 |
| 四氢呋喃 | 14.36 | 43.52 |
| 甲苯 | 19.38 | 58.71 |
LOD:检测极限;定量限:量化的极限
表6:检测和量化在ppm的极限。
(A1)
(A2)
精度
从盘中精密研究精密实验获得的数据表明,% SD值低于5.0%,主要添加内部标准(之后表7),确认方法是足够精确的。inter-day精度,在不增加内部标准,方法不精确(RSD为> 6% (RS) (表8),显示高可变性,但在添加内标之后,% RSD值小于6%,显示内部标准的角色在方法的精度的提高。在文学、重复性标准偏差的变化从一个到另一个地方学习。
| 分析了溶剂 | SD(%)使用前的内部标准 | SD(%)使用后的内部标准 |
|---|---|---|
| 甲醇 | 2.81 | 3.12 |
| 乙醇 | 1.93 | 1.56 |
| 丙酮 | 1.31 | 1.15 |
| Propan-2-ol | 1.5 | 0.47 |
| 乙腈 | 3.53 | 4.8 |
| 二氯甲烷 | 1 | 2.12 |
| 乙酸乙酯 | 3.66 | 3.52 |
| 四氢呋喃 | 1.26 | 0.79 |
| 甲苯 | 1.47 | 0.29 |
表7:盘中精度的研究。
| 之前使用一个内部标准 | 使用后的内部标准 | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| SD (%) | 标准偏差 | SD (%) | 相对标准偏差(%) | |||||
| 分析了溶剂 | j - 1 | J2 | J3 | (%) | j - 1 | J2 | J3 | |
| 甲醇 | 2.13 | 2.81 | 1.97 | 11.02 | 2.56 | 3.12 | 1.11 | 5.28 |
| 乙醇 | 1.59 | 1.93 | 2.02 | 5.17 | 2.16 | 1.56 | 2.02 | 5.17 |
| 丙酮 | 0.94 | 1.31 | 0.79 | 5.95 | 1.69 | 1.15 | 1.05 | 4.04 |
| Propan-2-ol | 1.73 | 1.5 | 1.09 | 4.62 | 1.67 | 0.47 | 0.68 | 5.43 |
| 乙腈 | 3.08 | 3.53 | 1.46 | 6.18 | 4.29 | 4.8 | 1.35 | 4.92 |
| 二氯甲烷 | 1.12 | 1 | 1.95 | 12.06 | 1.77 | 2.12 | 1.11 | 4.55 |
| 乙酸乙酯 | 1.33 | 3.66 | 0.76 | 6.83 | 1.3 | 3.52 | 1.1 | 3.34 |
| 四氢呋喃 | 1.89 | 1.26 | 1.24 | 17 | 1.89 | 1.26 | 1.24 | 5.44 |
| 甲苯 | 1.61 | 1.47 | 0.79 | 15.1 | 1.13 | 0.29 | 1.57 | 5.5 |
表8:Inter-day精度的研究。
精度
复苏的个人溶剂使用以下公式计算:情商。(A3)。
方法的准确性检查两个活性物质nefopam和伊诺肝素,RS可能存在甲醇,甲苯,nefopam伊诺肝素和甲醇、乙醇。
意味着复苏(意思是美国南达科他州±)计算每个溶剂。从数据如图所示表9和10,我们已经获得了良好的复苏在85%和115%之间。
| 浓度 | 恢复研究甲醇 | 恢复研究甲苯 | ||
|---|---|---|---|---|
| 复苏% | 平均(%)±标准差 | 复苏% | 平均(%)±标准差 | |
| 120% | 81.12 | 88.37±7.85 | 93.67 | 97.01±2.93 |
| 87.28 | 98.25 | |||
| 96.7 | 99.12 | |||
| 100% | 99.01 | 102.12±3.98 | 100.02 | 101.36±1.54 |
| 106.6 | 103.04 | |||
| 100.75 | 101.02 | |||
| 80% | 97.09 | 93.82±2.84 | 98.87 | 101.62±2.62 |
| 92.04 | 104.1 | |||
| 92.32 | 101.88 | |||
表9:复苏的研究在nefopam RS。
| 浓度 | 恢复研究甲醇 | 恢复研究乙醇 | ||
|---|---|---|---|---|
| 复苏% | 均值(%)±南达科他州 | 复苏% | 均值(%)±南达科他州 | |
| 120% | 97.04 | 99.47±2.11 | 92.59 | 91.05±1.40 |
| 100.51 | 89.84 | |||
| 100.85 | 90.73 | |||
| 100% | 106.11 | 108.30±2.29 | 95.06 | 96.79±1.51 |
| 111年 | 97.49 | |||
| 107.79 | 97.83 | |||
| 80% | 111.48 | 110.76±2.80 | 101.28 | 100.31±3.00 |
| 107.36 | 96.95 | |||
| 113.45 | 102.71 | |||
表10:在伊诺肝素复苏研究RS。
一些作者,范围从90%到110%或80% - 120%被接受(27,29日]。许多作者选择对学生测试统计,t计算应该不如t表(28,29日]。
我们可以得出结论,我们的方法可以量化的RS限制令人满意的精度。
应用程序
发达的方法应用于研究和量化的RS可能出现在一些药物物质。
分析样本nefopam并不包含任何微量甲醇和甲苯。获得的色谱图只显示内部标准和DMSO峰值。
伊诺肝素样本获得的色谱图显示了甲醇和乙醇的峰;其计算公式后定量限Eq (A4)。
CSTD标准溶液中溶剂的浓度(毫克/毫升);CE中活性物质的浓度检测解决方案(毫克/毫升);AE峰面积的比值在检查解决方案;美国是标准溶液的峰面积之比。
结果对甲醇和乙醇含量分别为42.35 ppm, 41.92 ppm;广泛不如我指定的准则,分别为3000和5000。
RS的存在是必不可少的在制药过程的每一步,因为没有疗效,控制和量化的限制在活性物质和成品是必不可少的,由于其毒性,对人类和环境有害的影响效果,医药产品的生物利用度、安全与稳定。
我采取了杂质RS指南。其目的是推荐接受大量的RS在病人的药品安全,指示的使用更少的有毒溶剂和描述水平被认为是毒理学地接受。
欧洲药典采用RS的控制方法的引用,使类的量化3溶剂,所以重要的是开发其他内部使用常规控制方法并验证它们之前。
在我们的研究中,我们已经开发和优化研究和量化的分析方法使九RS水平类2和3。初步体验欧洲药典的选择,结果是不充分的,如长期的时间和一个贫穷的决议,继续优化。
发达GC方法支撑材提供了简单性和选择性,产生对称的峰的形状,好和合理的保留时间不同的溶剂,它从色谱图可以看到,所有的溶剂筛选了17分钟前注入样品。该方法具体(Rs > 2);精确(SD < 5%,可重复性和相对标准偏差< 6%,中间精密度);和线性范围从量化的报告水平限制限值的120%,相关系数大于0.999。醋酸正丁酯作为内部溶剂的使用,提高了线性度和精度的方法补偿发生的变化。
发达的方法应用于研究和量化的RS含量两种药物物质nefopam和伊诺肝素。结果没有超过指定的金额我指导方针。因此,我们的方法可以应用RS常规量化的水平在不同的活性物质,为制药公司和研究实验室。
作者扩展他们的感谢UNIMED实验室Kalaa Kebira,突尼斯,支持这个项目。
作者宣称他们没有相互竞争的利益。
