DPPH法测定莲叶甲醇提取物和水提物的抗氧化活性

摘要

的甲醇提取而且水提取研究了其抗氧化性能。植物化学筛选表明，其中含有黄酮类化合物、单宁酸、皂苷和植物甾醇等不同类型的化合物。采用(1,1-二苯基-2-苦基肼)自由基清除法测定了该植物甲醇提取物和水提物的抗氧化活性，结果表明甲醇提取物的自由基清除活性高于水提物。IC50为17 (μg/ml)。

关键字

Urena兜水母目亚麻，抗氧化活性，甲醇提取物，水提取物

简介

草药现在的生物在现代剂型使用现代制造和加工技术。现代中草药的研究主要集中在活性引导分离(AGI)中。许多用于草药的植物含有化学成分，其作用可以在药理学上得到证明。因此，草药/传统药物源自古代文明的丰富传统和科学遗产[1，2］．自由基被认为是分子的碎片。它们在自然界中是高度反应性的，因此被称为活性氧，寿命很短。它们在人体正常运作过程中不断产生，也通过环境污染、香烟、烟雾、汽车尾气、辐射、空气污染物、农药等产生。自然地，在体内产生的自由基和抗氧化剂之间有一个动态平衡，以熄灭或清除它们，并保护身体免受它们的有害影响。酚类化合物可直接捕获自由基，或通过与抗氧化酶的一系列偶联反应清除自由基[3.］．目前可用的合成抗氧化剂，如丁基羟基茴香醚(BHA)、丁基羟基甲苯(BHT)、叔丁基对苯二酚和没食子酸酯，被怀疑会导致或促进负面的健康影响。因此，它们的应用受到了严格的限制，而且有一种趋势是用天然存在的抗氧化剂取代这些合成抗氧化剂，尽管这些合成抗氧化剂具有低溶解度和中等抗氧化活性[4］．自由基的形成主要有三种方式:(1)电子转移自由基的形成[2]，由溶血裂变和[3.]，通过杂裂裂变形成离子。

自由基的产生可能是偶然的，也可能是有意的。好氧细胞中自由基生物化学中最重要的反应物是氧衍生物(超氧化物、羟基自由基)、过氧化氢和过渡金属。细胞内形成的活性自由基可氧化生物分子，导致细胞死亡和组织损伤。细胞已经形成了抗氧化防御机制，以防止自由基的形成或限制自由基的破坏作用。这包括分解过氧化物的酶，隔离过渡金属的蛋白质和清除自由基的一系列化合物。

Urena兜水母目亚麻属，是一种直立的草本或半木质，在灌木下被绒毛[5］．主要成分Urena兜水母目包括黄酮类化合物、糖苷、β-谷甾醇和豆甾醇、呋喃香豆素、欧前胡素、芒果苷和槲皮素[6］．它还含有山奈酚、木犀草素、低脂素和棉皮素[7］．人们发现这种植物的传统用途是利尿、退热、治疗风湿、疟疾、淋病、伤口和牙痛。它也被用作动物和人类的食物[3.］．虽然关于生理特性的信息Urena兜水母目众所周知，它的抗氧化性能还没有完全研究出来。本研究旨在研究黄芩的抗氧化活性Urena兜水母目林恩。

材料与方法

植物材料的收集和鉴定

的植物材料Urena兜水母目来自印度阿鲁瓦的喀拉拉邦阿育吠陀有限公司的草药花园部门，并经过鉴定。标本凭证存放在学院植物标本室，以备日后参考。甲醇、1,1二苯基- 2-苦味基肼(DPPH)和抗坏血酸采购自印度班加罗尔的Sd精细化工公司。所有其他使用的化学品都是分析级的。

植物提取Methanolic提取

粗料被称重，标记，并提交到绿色化学实验室，Domlur，班加罗尔，印度进行提取。粗粉(3.0公斤)整株Urena兜水母目加入20升圆底烧瓶中，并配有回流冷凝器。在上述设置中，加入15 L甲醇，混合物在65°C下回流约1小时。最后对混合物进行过滤并收集提取物。用15 L甲醇重复提取过程，并将所有提取物组合。然后将水在95°C的Buchi旋转蒸发器中减压蒸发，以获得105克粉末提取物。

水提取

145克粉末提取物Urena兜水母目从水萃取物中按照先前在甲醇萃取中所解释的程序进行开发。但在这种情况下，温度保持在100°C以回流混合物[7］．

DPPH溶液的制备

从该原液中加入0.375 ml到每个试管中。

测试溶液的准备

用蒸馏水制备不同浓度的甲醇提取物和水提物(5 ~ 100μg/ml)。将不同浓度的提取物混合物加入1.5 ml新鲜制备的DPPH溶液中(3mg加入12 ml甲醇)。用甲醇溶液(0.25 g/l)配制成2 ml溶液，20 min后，515 nm下测定，以抗坏血酸为标准品。本文介绍了黄芪水提物和甲醇提物的测定方法Urena兜水母目显示在表1．

激进的清除活动(抑制率和IC₅₀值)按以下公式计算:

百分比抑制=(一个对照-一个样本/一个对照)×100

式中，A对照=对照(抗坏血酸)的吸光度，A样品=反应混合物的吸光度(样品存在时)。所有试验均重复进行3次(n = 3)，并计算平均值。

集成电路₅₀价值

抑制浓度(IC₅₀)由Amit Subedi及其同事引入，用于DPPH方法结果的解释。为了计算IC，将样品的变色与样品浓度进行对比₅₀价值。它被定义为使DPPH吸光度降低50%所需的样本量[8］．

植物及其产品多年来一直被用于人类健康。还有许多具有各种药用价值的植物尚未被开发和利用。植物中含有许多具有药用价值的新化合物，需要科学探索。自由基在需氧细胞中产生，因为细胞生长消耗氧气[9，10］．自由基导致膜流动性下降、酶受体活性丧失及膜蛋白损伤，导致死亡[11］．这些自由基与不同的疾病有关，比如衰老，癌症，心血管病，糖尿病，类风湿性关节炎，癫痫&必需脂肪酸的降解[9，10］．抗氧化剂有助于治疗上述疾病。该植物甲醇提取物具有与抗坏血酸相当的剂量依赖性抗氧化活性，可开发用于治疗上述自由基相关疾病的抗氧化剂。提取物的抗氧化活性Urena兜水母目显示在表2．

抗氧化研究在水提取物Urena兜水母目（表3)具有较弱的抗氧化活性，而甲醇提取物具有较好的抗氧化作用。集成电路₅₀抗坏血酸的含量为17 (μg/ml)。

抗氧化研究的统计分析显示在表4而且图1．

皮尔逊相关(图1水提物的浓度和吸光度增加之间的关系Urena兜水母目显示-ve相关，即-0.977，具有显著性(1尾)，<0.05Urena兜水母目Pearson相关系数为-0.844，显著性(1尾)<0.05。

结论

我们的研究结果表明，印度仍有许多传统上没有使用但具有药用价值的植物。因此，科学研究也需要集中在传统上不使用的植物上。为了表征植物提取物的抗氧化活性，有必要对其进行一系列测试，以评估其活性范围，如DPPH、asUrena兜水母目甲醇提取物和水提取物的体外抗氧化活性表明，甲醇提取物和水提取物可作为天然抗氧化剂或营养药物的来源，用于减少氧化应激，从而对健康有益。

参考文献

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6. 柯沙布Ghosh。从欧前胡素中分离出来的一种呋喃香豆素Urena兜水母目(锦葵科)，Molbank, 2004;382。
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9. Barros L, Ferreira MJ, Queiros B, Ferreira ICFR & Baptista P.葡萄牙野生食用菌中的总酚、抗坏血酸、B -胡萝卜素和番茄红素及其抗氧化活性食品化学。2007;39:413。
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11. 李小明，李小林，周AG。枸杞果实多糖的体外抗氧化活性评价。欧洲保利J. 2007;43: 488。
12. Bondet V, Brand-Williams W & Berset C, DPPH自由基法抗氧化活性的动力学和机制。LWT-食品科技，1997;30: 609。