研究和评论:制药学和纳雷竞技苹果下载米技术杂志》上
菜单e-ISSN: 2347 - 7857 p-ISSN: 2347 - 7849
e-ISSN: 2347 - 7857 p-ISSN: 2347 - 7849
Sakshi Dubey1Dharmendra K Sinha1,M Senthil基于1辛格,着手列宁1Mahtab Z西迪基2普拉萨德,Niranjan2,Prasanna Vadhana3,莫妮卡Bhardwaj3Bhoj R辛格1*
3细菌学和分工真菌学,印度ICAR-Indian兽医研究所
收到日期:15/10/2015接受日期:19/11/2015发表日期:25/11/2015
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阿拉伯树胶、口香糖Chironji口香糖刺梧桐树,口香糖Balanites aegyptiaca,口香糖Prosopis juliflora,沙门氏菌,大肠杆菌,克雷伯氏菌肺炎,流产布鲁,博代氏杆菌属bronchiseptica, Pasterurella multocida。
可食用的牙龈以不同的名称即,贡德人,Goond, Goond katira,丁卡、Gaund, Gondh干sap(分泌物)棘手的树木和灌木。牙龈豆科乔木和灌木的家庭(金合欢,苹婆属、黄芪、Balanites、Buchanania Anogeissus物种)可以食用1]。食用牙龈水溶性生产粘胶等解决方案。它们用于食品工业增厚、胶凝、乳化、稳定剂(1]。由于他们的粘合剂、绑定、澄清封装、絮凝、肿胀牙龈和泡沫稳定属性有多个应用程序在多个行业中1,2]。牙龈是离子聚合物(聚合电解质)的酸性糖肤包含几个生物活性化合物和矿物盐(3]。常见的可食用的牙龈来自种虫害的树木和被称为阿拉伯树胶,chaar, char goond或meska [1]。它主要来自两种金合欢树即,塞内加尔和a . seyal。其它食用牙龈有市场;口香糖ghatti(从Anogeissus树),黄蓍胶(从黄芪灌木,贡德人katira),(从刺梧桐树口香糖苹婆属树),胶假阿拉伯胶树(来自金合欢nilotica),口香糖chironji(从Buchanania lanzan树),牙龈Balanites aegyptiaca和Prosopis juliflora也可食用(1,4]。
抗菌活性牙龈总是作为一个有争议的问题由于几个对比报告(1]。阿拉伯树胶的酒精提取物和水提取物抑制增长肺炎链球菌,金黄色葡萄球菌,金黄色epidermidis aeroginosa假单胞菌、变形杆菌merabilis,不动杆菌属、肠杆菌属,肺炎克雷伯菌、沙雷氏菌属spp。大肠杆菌、伤寒沙门氏菌Cerospora pongamae,白色念珠菌和黑曲霉(5,6]。虽然口香糖chironji报道在肋间的疼痛和有益腹泻报道说,很少对其抗菌活性(1]。抗菌和抗真菌的活动报道的酒精提取物Balanites aegyptiaca树叶、树皮和果实中果皮[7- - - - - -11抑制——B-lactmase金属生产大肠杆菌、克雷伯氏菌。和枸橼酸杆菌属spp。11尽管热的和冷的水提取物Prosopis juliflora(Vilayati kikar)抑制枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、粪肠杆菌肺炎,绿脓杆菌,金黄色葡萄球菌,s . epidermidis链球菌、伤寒杆菌和沙门氏菌感染(12),其胶很少被报道具有抗菌活性。口香糖刺梧桐树从苹婆属urens树已被用作牙科设备和osteomyo——设备、胶粘剂和基地水杨酸补丁(13,14),细菌粘附减少98%,当应用被称为保护涂层假牙(14),但其抗菌活性还没有报道。抗菌活性的油性树脂(不可食用的牙龈)也类似于纹理是食用牙龈经常报道(15抗菌活性),信息的可食用的牙龈是稀疏的,使用参考实验室菌株主要是基于测试(1]。缺乏信息的抗菌活性也不是在临床上重要的病原体,限制食用牙龈的理解效用作为天然抗菌剂。本研究旨在确定的抗菌活性ethanolic提取常见的可食用的水溶液的牙龈在印度在临床上重要的细菌。
牙龈
共有31个样本(正式认证和编目ICAR-Indian研究所天然树脂和树胶(IINRG) Namkum,兰契)金合欢nilotica(假阿拉伯胶树)胶(17),Buchanania lanzan(Chironji)口香糖(7),苹婆属(刺梧桐树)口香糖(5),Balanitesaegyptiaca口香糖(1)Prosopis juliflora口香糖(1)收集/采购新鲜的集合(从全国各地聚集)可以在IINRG,兰契(表1)。手工清洗和排序后的口香糖样品都转化成细粉,通过0.4毫米孔筛和用气密容器进行进一步分析。
| 胶类型 | 集合的地方 | 序列号的样本收集 |
|---|---|---|
| 阿拉伯树胶 | Sitapur、北方邦 | 1 |
| Hissar,哈里亚纳邦 | 2 | |
| Karnal, Haryan | 3 | |
| Rohtak,哈里亚纳邦 | 4 | |
| 阿姆利则,旁遮普 | 5 | |
| Bundi,拉贾斯坦邦 | 6 | |
| 比拉斯布尔,ChattisGarh | 7 | |
| Balaghat、中央邦 | 8 | |
| 贾巴尔普尔,中央邦 | 9 | |
| Gondia-I,马哈拉施特拉邦 | 10 | |
| Mayurbhanj,奥里萨邦 | 11 | |
| Anand,古吉拉特邦 | 12 | |
| 焦特布尔,拉贾斯坦邦 | 13、14 | |
| Gondia-II,马哈拉施特拉邦 | 15 | |
| 默克、印度 | 25 | |
| Hi-Media,孟买 | 24 | |
| 口香糖Chironji | 比拉斯布尔,ChattisGarh | 16 |
| 兰契Simdega,恰尔肯德邦 | 17 | |
| ICAR-IINRG农场,兰契,恰尔肯德邦 | 18一个 | |
| Dindori、中央邦 | 18 b | |
| Umaria、中央邦 | 19、20 | |
| Sitapur、北方邦 | 21 | |
| 口香糖Balanitesaegyptiaca | 焦特布尔,拉贾斯坦邦 | 22 |
| 口香糖Prosopisjuliflora, | 焦特布尔,拉贾斯坦邦 | 23 |
| 口香糖刺梧桐树 | Girijan合作有限公司,Visakhaptnam,安得拉邦 | 26 - 30日 |
表1:明智的来源分布口香糖样品测试抗菌活性的研究。
Ethanolic提取的牙龈
Ethanolic提取(EE), 250克粉胶混合在一个1 L锥形瓶500毫升的99.9%纯乙醇(SD精细化学有限公司、孟买)。烧瓶在一夜之间保持在25°C,在旋转(30 rpm)平台。此后,烧瓶的内容都是透过玻璃棉滤滤液中恢复过来。滤液被转移到无菌浅碗和乙醇被允许蒸发在烤箱50°C与排气过夜。第二天早上在碗收集所有可用的干物质,称重和保存在密封的螺旋盖瓶在4°C到测试在一个月内。为了测试抗菌活性,光盘的EE被溶解300毫克的EE准备3毫升乙醇,然后吸附溶液6毫米无菌盘(20μl),光盘被允许在室温下干燥在干燥器,然后储存在干燥和无菌瓶在4°C到在一个月内使用。
水提物(解决方案)的牙龈
使胶溶液在水中4% (w / v) 2通用胶加入50毫升无菌水的消毒锥形瓶,通过保持可溶性烧瓶在温暖(50°C)震动(50 rpm)水浴30分钟。所有胶解决方案在同一天进行抗菌活性使用琼脂扩散试验(16]。
菌株
四个参考株,敏感,所有常用抗菌素(链球菌milleriSM-22;芽孢杆菌mycoidesB29 -之时价;大肠杆菌e - 382;沙门氏菌abortusequie - 155),印度兽医研究所流行病学实验室,从甘油股票和重新检测纯度和身份和维护在营养琼脂偏没有进一步接种整个研究[17]。除此之外,97年从临床和环境来源隔离(表2)维护在甘油股票和孤立的最后三个月期间的临床流行病学实验室部门的24种6属革兰氏阳性细菌(34)(加仑桶)和27种19个属的革兰氏阴性细菌(63)(GNB)包括在这项研究中筛选抗菌活性的EE和牙龈的水溶液。
| 测试(没有细菌。压力测试) | 一些敏感的菌株, | 麦克风的EEµg /毫升 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| GA9 | GA4 | GC19 | Cip10 | GA9 | GA4 | GC | ||
| Acinetobacterbaumannii(1) | 1 | 1 | 1 | 1 | 1280年 | 1280年 | 2560年 | |
| Actinobacillusactinomycetencomitans(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 2560年 | 2560年 | > 2560 | |
| Aerococcussanguinicola(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 320年 | 320年 | > 2560 | |
| Aerococcusurinae(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 320年 | 320年 | > 2560 | |
| Aeromonasbestiarum(6) | 3 | 3 | 0 | 6 | 80 - > 2560 | 80 - > 2560 | 1280 - > 2560 | |
| Aeromonasschubertii(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 320年 | > 2560 | |
| Aeromonasveronii(2) | 2 | 2 | 2 | 2 | 160 - 640 | 160 - 640 | 1280 - 2560 | |
| 芽孢杆菌alvei(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 蜡样芽胞杆菌(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 80年 | 80年 | > 2560 | |
| 芽孢杆菌firmus(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 320年 | 320年 | > 2560 | |
| 芽孢杆菌mycoides(4) | 4 | 4 | 2 | 4 | 80 - 640 | 80 - 640 | 1280 - > 2560 | |
| 芽孢杆菌sphaericus(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 320年 | 320年 | > 2560 | |
| Bordetellabronchiseptica(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| Brucellaabortus(6) | 6 | 6 | 1 | 5 | 160 - 640 | 160 - 640 | 640 - > 2560 | |
| Citrobacterfreundii(2) | 1 | 1 | 0 | 2 | 1280 - > 2560 | 1280 - > 2560 | > 2560 | |
| Edwardsiellatarda(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| Enterobacteragglomerans(3) | 0 | 0 | 0 | 2 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 肠球菌鸟结核(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 肠球菌杜兰(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 粪肠球菌(1) | 1 | 1 | 0 | 0 | 1280年 | 1280年 | > 2560 | |
| Erwiniacaratovora(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 640年 | 640年 | > 2560 | |
| Erwiniaherbicola(1) | 1 | 1 | 1 | 1 | 640年 | 640年 | 640年 | |
| 大肠杆菌(14) | 1 | 0 | 0 | 12 | 1280 - > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 大肠fergusonii(2) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| Klebsiellaoxytoca(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| Klebsiellapneumoniae(4) | 0 | 0 | 0 | 4 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 微球菌瓦里安(3) | 3 | 3 | 0 | 2 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 莫拉克斯氏菌属osloensis(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 80年 | 80年 | > 2560 | |
| Pasteurellacanis(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 80年 | 80年 | > 2560 | |
| Pragiafontium(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 变形杆菌(2) | 1 | 1 | 0 | 1 | 320年 | 640年 | > 2560 | |
| 变形杆菌属寻常的(1) | 0 | 0 | 0 | 2 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| Providenciastuartii(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 640年 | 640年 | > 2560 | |
| 铜绿假单胞菌(2) | 0 | 0 | 0 | 2 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 荧光假单胞菌(3) | 0 | 0 | 0 | 3 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 假单胞菌testosteronii(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 1280年 | 1280年 | > 2560 | |
| Raoultellaterrigena(3) | 0 | 0 | 0 | 3 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 沙门氏菌abortusequi(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 鼠伤寒沙门氏菌(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 金黄色葡萄球菌ssp。(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。capitisssp。urealyticus(1) | 0 | 0 | 0 | 0 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。caseolyticus(1) | 1 | 1 | 0 | 0 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。色原(2) | 2 | 2 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。猫属(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。haemolyticus(2) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。中间部(2) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 葡萄球菌。hominis(1) | 1 | 1 | 0 | 0 | 320年 | 640年 | > 2560 | |
| 链球菌宝(2) | 1 | 1 | 0 | 2 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| Strept。dysgalactiae(1) | 0 | 0 | 0 | 1 | > 2560 | > 2560 | > 2560 | |
| Strept。milleri(4) | 2 | 2 | 1 | 4 | 1280 - > 2560 | 1280 - > 2560 | > 2560 | |
| Strept。武器装备ssp。equisimilis(1) | 1 | 1 | 1 | 1 | 80年 | 80年 | 160年 | |
| Strept。化脓性链球菌(1) | 1 | 1 | 0 | 1 | 160年 | 160年 | > 2560 | |
| 总(101)敏感菌株(%) | 50 (49.5) | 49 (48.5) | 9 (8.9) | 88 (87.1) | 80 - > 2560 | 80 - > 2560 | 160 - > 2560 | |
| EE, ethanolic提取(EE);光盘GA9 2毫克的阿拉伯树胶EE样例9号;光盘GA4 2毫克的阿拉伯树胶EE样4号;GC19 2毫克口香糖Chronji EE样品号19日光盘Cip10,环丙沙星光盘(10µg)。 | ||||||||
表2:抗菌活性和最低抑制浓度的酒精提取的阿拉伯树胶(金合欢nilotica)和牙龈Chironji (Buchanania lanzan)对菌株的公共卫生问题。
抗菌活性测试
纸片扩散试验使用EE光盘进行如前所述[16,18在一式三份)对不同细菌穆勒辛顿琼脂(尼古拉斯,BD洗液和Difco)板、拭子接种隔夜肉汤培养(0.1 OD590)。所有菌株在尼古拉斯但检测灵敏度莫拉克斯氏菌属、链球菌、布鲁氏菌、博代氏杆菌属和巴斯德菌(缓慢增长,挑剔的)压力测试在脑心浸液(BHI)琼脂(BD洗液和Difco)而不是尼古拉斯(18]。所有菌株进行了测试在37°C从有氧锻炼除了布鲁氏菌,这是37°C 5%孵化有限公司2丰富的环境。环丙沙星(10μg)光盘(BD洗液和Difco)和空白光盘(第一次浸泡在乙醇和干在同样的方式为EE光盘)被用作标准抗菌素和消极的控制盘,分别。
确定麦克风EE的口香糖样品
这是使用琼脂扩散试验使用合适的琼脂板执行(尼古拉斯/ BHIA)在每个板[9井无聊16]。盘子被拭子接种试验菌株所述阀瓣扩散试验,然后50μl EE的解决方案在二甲亚砜(DMSO,默克公司印度)涌入每。在第一个DMSO没有情感表达是用作-控制在2nd到9th50μl DMSO包含20,80,160,320,640,1280μg和2560μg口香糖EE,分别是涌入。没有反相3人力资源板块被孵化。所以,内容得到扩散到周围介质,然后孵化纸片扩散试验。24小时之后。孵化的抑制增长板块观察井。井周围的抑制增长最低EE被认为是麦克风EE的口香糖。如果没有抑制细菌在一个盘子然后麦克风记录为> 2560μg /毫升。
统计分析
确定相关性抑制区直径(毫米)的细菌在EE光盘和麦克风,使用MS Office Excel-7相关系数进行了计算。估计之间的关系的敏感性细菌EE的牙龈和种类的细菌,χ2测试是在MS Office excel - 2007执行。统计比较了只有那些属的细菌数量的压力测试(n)属≥10。
所有的101株包括4引用(链球菌milleriSM-22;芽孢杆菌mycoidesB29-19-1;大肠杆菌e - 382;沙门氏菌abortusequie - 155)菌株被水溶液的31个口香糖样品。光盘的EE只有三个口香糖样品(没有。4和9的阿拉伯树胶,没有。19口香糖chironji)因变量的生长抑制(表2)。所有三个ee抑制细菌的增长未能抑制增长的两个参考GNB菌株同时参考加仑桶的菌株都被这三个ee有抗菌活性。101株,对EEA-9 50株(49.5%)敏感,49 (48.5%)EEC-19 EEA-4和9例(8.9%)。有接近完美的抑制区之间的相关性(r = 0.87)由EEA-4和EEA-9光盘不同的细菌引起的。
包括4参考菌株,总共有88(87.1%)菌株对环丙沙星敏感的磁盘。36的交换容量测试,26日是敏感EEA-4 EEA-9, 4 EEC-19和28对环丙沙星磁盘。65 GNB压力测试,60岁,24岁,23岁,5环丙沙星敏感,EEA-9, EEA-4,分别和EEC-19磁盘。
对经济区的敏感性更普遍交换容量比GNBs (p = 0.0007),但没有显著差异明显EEC (p = 0.56)。环丙沙星抗性更常见(p = 0.04)加仑桶比GNB菌株。
EEA的最低抑制浓度(MIC)从阿拉伯树胶样品没有。4和9为敏感菌株范围1280到80μgμg /毫升GNBs 640和80μgμg交换容量(表2)。敏感菌株的麦克风是最低(80μg /毫升)气单胞菌属bestiarum,莫拉克斯氏菌属osloensis, p .犬属和链球菌等和最大(2560μg /毫升)放线杆菌actinomycetencomitans菌株。麦克风的EEC-19 Strept最低(160μg)。武器装备和最大(2560μg /毫升)不动杆菌baumanii菌株,范围在640μg为其他敏感菌株1280μg /毫升。所有菌株对经济区和欧共体麦克风> 2.56毫克/毫升(表2)。
天然可食用的牙龈虽然在一些报道(据报道,抗菌5,6),通常被认为是没有抗菌活性(1]。提出了研究的三个31口香糖样品之前合作检测抗菌活性的观察(1]。差异报告组成不同的胶样品(1,3,4)可能在EE负责抗菌活性的三个口香糖样品而不是其他口香糖样品。抗菌活性只有在酒精提取但不是在水溶液牙龈的早期研究协议(5,6,11,19- - - - - -22]。这项研究还显示,EE的阿拉伯树胶样品没有。9(从贾巴尔普尔)有点50株细菌的抑制增长比EE阿拉伯树胶的样品没有。4从Rohtak(抑制只有49),但在统计学上并不显著的区别和麦克风的研究也显示类似的麦克风的经济区为不同的细菌。抗菌活性的阿拉伯树胶样本的差异无法解释的基础上源(地理区域),在同一地区样本无抗菌活性。区别可能属于株的来源,但这需要进一步的研究验证和说明的变化的确切原因。
广泛的阿拉伯树胶EE的活性,对50株细菌属于35种交换容量和GNBs表示存在一个有前途的抗菌化合物在阿拉伯树胶。据报道,在早期研究阿拉伯树胶提取物抑制增长12株的引用美国epidermidis金黄色葡萄球菌,肺炎链球菌,p . aeroginosa普罗透斯merabilis,不动杆菌属、肠杆菌属、肺炎克雷伯菌、沙雷氏菌属spp。大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、白色念珠菌(6和参考的蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌、黑曲霉和尾孢属pongamiae(23]表明广泛的抗菌活性。然而,这项研究似乎是第一个报告阿拉伯树胶提取物的抗菌活性在临床上重要的细菌。此外,从早期的研究6,23]的变化敏感性不同的相同的菌株没有明显,这项研究说明,只有一小部分的大肠杆菌、变形杆菌属、气单胞菌属、葡萄球菌和链球菌菌株容易受到阿拉伯树胶的抗菌作用。目前的研究表明,基于研究结论仅使用几个参考菌株实际上可能不总是有用的。此外,检测的灵敏度在几株细菌或其他细菌的抵抗几株表示,可能会有一些机制对植物抗菌素耐药性的出现(正如前面提出的16,24- - - - - -26]。
在牙龈chironji或其提取物抗菌活性没有早些时候报道(1,19]。在当前研究的一个7口香糖样品有一些抗菌素可能也对几株气单胞菌属veronii, b . mycoides流产布鲁氏菌和美国milleri表明其脆弱的抗菌素的潜力。
缺乏任何抗菌活性的检测口香糖的样本苹婆属(刺梧桐树),Balanites aegyptiaca和Prosopis juliflora在同时发生的早期研究1,11,12,27- - - - - -29日]。这可能是由于缺乏抗菌潜在的可食用的牙龈或由于少数量的样品进行了分析。
所有这三个胶样品在他们的酒精提取物抗菌活性从三个不同的区域(表1)但从相同或附近地区其他样品相同的口香糖对抗菌潜在不利。观察没有理由可以被分配的基础上,本研究需要进一步探索。
尽管食用牙龈可能不被认为是有用的抗菌素治疗用途(1),牙龈的效用在绿色合成的纳米粒子,纳米纤维抗菌支架用于沙拉酱和nano-capsules药或膜包装是新兴的快速27,30.- - - - - -34]。此外,进一步的研究可能会导致积极的抗菌成分的识别可能是一个潜在的口香糖。
虽然,阿拉伯树胶的抗菌活性广泛,只有两个17的样本中,检测出。同样,只有一个7的口香糖chironji样本具有抗菌活性。阐明抗菌背后的原因可能只在一些口香糖样品和积极的抗菌成分的识别食用胶样品需要进一步的研究。此外,酒精提取物中的活性抗菌物质的识别阿拉伯树胶和树胶chironji可能进一步研究的重要领域。
作者感谢导演,联合导演(R)和联合ICAR-Indian兽医研究所(A)主任Izatnagar研究允许和授予奖学金Sakshi Dubey, m . Senthil基于,着手列宁辛格Prasanna Vadhana ICAR-IINGR Monika Bhardwaj和董事,兰契允许为胶样品的制备和采购工作。作者还感谢HC Joshi先生和Laikurahman一致实验室维护活动。
